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圖為：工作人員把存放病毒的密封盒放進(jìn)特殊儲存罐 楚天都市報(bào)記者李輝攝
圖為：實(shí)驗(yàn)師張艷芳從冰箱中取出病毒 近日，中科院武漢病毒研究所微生物菌（毒）種保藏中心，正式成為全國四個“國家級保藏中心”之一。這意味著，該中心具備資質(zhì)保藏埃博拉、尼帕等危害等級最高的病毒病原，便于開展相關(guān)科研活動。 這里擁有亞洲最大的病毒保藏庫，保藏著1500多株各類病毒的分離株，涵蓋全球已對外發(fā)布病毒科的1/3，其中包括讓人聞之色變的寨卡、新疆出血熱等病毒株。 5月16日，楚天都市報(bào)記者探訪了這個神秘的病毒庫，見證病毒從“清醒”到“沉睡”的奇妙過程。 本報(bào)記者見證病毒樣本分離 “一般人提到病毒就會害怕，這是因?yàn)椴涣私狻?rdquo;中科院武漢病毒研究所保藏中心副主任鄧菲說。經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的實(shí)驗(yàn)員，雖然天天與病毒打交道，但在嚴(yán)密措施保障下，可以安全進(jìn)行非烈性病毒的操作。 5月16日，楚天都市報(bào)記者獲準(zhǔn)進(jìn)入P2級病毒樣本分離室。P2級是相對較低的防護(hù)級別，但仍然“戒備森嚴(yán)”。在實(shí)驗(yàn)師吳巧麗的示范下，記者穿上長袖白大褂，套上藍(lán)色防護(hù)衣，再戴上口罩、帽子、鞋套、乳膠手套、塑料薄膜手套等。“這些都是專用的一次性防護(hù)用品，要求是盡量不暴露肌膚。”吳巧麗說。 實(shí)驗(yàn)師張艷芳正在進(jìn)行寨卡病毒的分離。她坐在生物安全柜前，胳膊在柜子里面操作，身體其它部位都在外面，眼睛隔著透明罩盯著手中的移液器，將紫紅色的寨卡病毒分裝到不同的培養(yǎng)瓶中，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。“紫紅色是指示劑的顏色。病毒是納米級的最小的生物，沒有顏色，我們會加入特殊的熒光染料，以便確定它們的存在。”張艷芳說。她事先在操作臺上墊了吸水巾，一旦出現(xiàn)樣本泄露，可以第一時(shí)間處理掉。 無論是移液，還是培養(yǎng)，張艷芳的動作都很輕緩。“操作過程中可能產(chǎn)生氣溶膠，看不見，人一旦接觸就可能感染，所以要非常小心。”她說。記者注意到，安全柜上方有個類似抽油煙機(jī)的裝置，把氣流往里抽，任何細(xì)小的氣體反應(yīng)都出不了安全柜。 各種病毒在不同溫度下沉睡 神秘的病毒保藏庫有兩道大門，外面的電子門上有“生物危險(xiǎn)”的警示標(biāo)志。 與室外的悶熱相比，保藏庫內(nèi)比較清涼。不足100平方米的庫房，被隔成4個小房間，其中一間放著一臺超大容量冰箱。其它三間分別是 -40℃、-80℃、-150℃的病毒保藏房，每間房都整齊擺放著多臺冰箱，所有冰箱上都掛著一把大鎖。 鄧菲介紹，保藏庫的窗戶上裝有紅外線防盜系統(tǒng)。工作人員進(jìn)入庫房、打開冰箱，必須至少兩人在場，且要履行完善的登記手續(xù)。 張艷芳戴著特制的防凍手套，打開一個顯示實(shí)時(shí)溫度為-77℃的冰箱。她介紹，每臺冰箱上都有發(fā)射器與辦公電腦相連，可遠(yuǎn)程監(jiān)控冰箱溫度變化，還有備用電源及時(shí)保障。 記者看到，該冰箱里面有4扇小門。張艷芳打開其中一扇門，里面排列著25個不銹鋼小抽屜。她拉開一個抽屜，塑料容器盒里排列著多支病毒凍存管，有的呈藍(lán)色，也有呈紅色，管身貼著編號和二維碼。“這些編號都有建檔，需要取什么病毒株，只要用電腦一查，就知道它的詳細(xì)位置。”鄧菲說。這些小小的凍存管中，保藏著肝炎、寨卡、流感、皰疹等病毒，在外人聽來有些不寒而栗，但對這里的科研人員而言，它們都是有用的生物資源。 “生死循環(huán)”讓病毒保持活性 “我們和農(nóng)業(yè)、林業(yè)、衛(wèi)生等系統(tǒng)都有合作，接收的病理樣本類型很多，有血液、尿液、糞便、咽拭子、腦脊液、皰疹液等。”鄧菲介紹。病毒保藏前的工作非常復(fù)雜，從接收病理樣本到進(jìn)行檢測、分離樣本、低溫冷凍，病毒從“清醒”到“沉睡”，是一個不斷精細(xì)化的過程。 當(dāng)檢測指向某些病毒后，實(shí)驗(yàn)師會對其進(jìn)行提純培養(yǎng)。“99%的微生物不可培養(yǎng)，病毒屬于剩下的1%。它們不能單獨(dú)存在，但可以通過細(xì)胞培養(yǎng)存在。”鄧菲介紹。病毒通過細(xì)胞膜侵入細(xì)胞后，會不斷自我繁殖，滴度越來越高。只有背景清晰、滴度最高的標(biāo)準(zhǔn)化病毒，才能進(jìn)入保藏庫。每個病毒株都有多個備份，清晰可溯源。 -40℃冰箱保藏的多是病料。病毒大多保藏在-80℃冰箱，能在一段時(shí)間內(nèi)保持高活性度。一旦病毒活性不足，要對其進(jìn)行“復(fù)蘇”，即把病毒接種到新鮮細(xì)胞中，啟動新一輪感染過程，讓病毒數(shù)量和活性回復(fù)到高水平狀態(tài)，再進(jìn)行保藏。 在60℃的環(huán)境中，病毒幾分鐘就會死亡。鄧菲介紹，將病毒株從休眠狀態(tài)下復(fù)活，就像一場“生死循環(huán)”。每種病毒的活化，都需要相應(yīng)的培養(yǎng)環(huán)境。比如寨卡病毒，要讓它感染猴子細(xì)胞，只能在37℃的培養(yǎng)箱中進(jìn)行；而要讓它感染蚊蟲細(xì)胞，則必須在28℃的培養(yǎng)箱中進(jìn)行。 “年紀(jì)”最大的病毒株30多歲 鄧菲介紹，中科院武漢病毒研究所微生物菌（毒）種保藏中心擁有亞洲最大的病毒保藏庫，目前保藏著1500多株各類病毒的分離株，涵蓋全球已對外發(fā)布病毒科的1/3，包括人類醫(yī)學(xué)病毒、人畜共患病毒、動物病毒、昆蟲病毒、植物病毒等。其中，“年紀(jì)”最大的病毒株已經(jīng)30多歲。 “這里保藏的新疆出血熱病毒，是我國唯一的四級病毒。像寨卡病毒，我們進(jìn)口了亞洲株、歐洲株、美洲株，分離培養(yǎng)出了種子批、工作批等，不僅保藏了資源，還服務(wù)于科研工作。”鄧菲說。該中心晉升“國字號”后，不僅與在漢建設(shè)的生物安全四級實(shí)驗(yàn)室相匹配，還可以按照國家相關(guān)規(guī)定，接收、檢定、集中儲存與管理菌（毒）種或樣本，向合法從事病原微生物實(shí)驗(yàn)活動的單位提供菌（毒）種或樣本，并出具國家標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株證明，并在技術(shù)研究、業(yè)務(wù)培訓(xùn)等方面發(fā)揮更大作用。 “經(jīng)過30多年累積的病毒資源，為科研工作提供了有力保障。尤其是最近幾年，保藏中心發(fā)展很快，每年新保藏一兩百種病毒。每一個病毒株都是寶貝，雖然有的暫時(shí)沒有實(shí)際作用，但未來一旦有需求，就會被喚醒并投入應(yīng)用。”鄧菲說。 |
